人 IL-2与 HBsAg融合基因重组卡介苗的构建与鉴定

作者：王子豪; 于沛伶; 潘玉成; 李运清; 刘昂; 薛庆节^*

来源：国际生物制品学杂志, 2021, 44(01).

• 白细胞介素2
• 肝炎病毒, 乙型
• 重组融合蛋白质类
• 卡介苗
• 肝炎表面抗原, 乙型

目的构建人IL-2与HBsAg融合基因并转化到BCG中构建重组BCG(recombinant BCG, rBCG), 为制备治疗和预防乙型肝炎和结核病的二联疫苗奠定基础。方法以IL-2 pMalLP质粒和HBsAg pMalLP质粒为模板, 设计引物, 利用PCR技术扩增HBsAg和IL-2基因, 进行重叠PCR获得融合基因IL-2-HBsAg并纯化, 将融合基因克隆至穿梭表达载体pMV261得到重组质粒, 电转化导入BCG感受态细胞, 以蛋白质印迹法检测融合基因在rBCG中的表达。结果 PCR扩增得到IL-2和HBsAg, 通过重叠PCR获得IL-2-HBsAg融合基因后成功插入穿梭表达载体, rBCG能表达融合蛋白。结论构建人IL-2与HBsAg融合基因重组质粒并导入BCG, 获得了稳定表达融合蛋白的rBCG。

• 单位
  基础医学院; 济宁医学院