TLR9对巨噬细胞向M1型极化及M1型巨噬细胞条件培养基诱导内皮细胞凋亡的影响

作者：童睿; 朱中生^*; 李锦玉; 阚丽虹

来源：江苏医药, 2021, 47(05): 443-446.

DOI：10.19460/j.cnki.0253-3685.2021.05.003

• Toll样受体9
• 巨噬细胞
• 人脐静脉内皮细胞
• 凋亡

目的探讨Toll样受体9(TLR9)对巨噬细胞向M1型极化及M1型巨噬细胞条件培养基诱导内皮细胞凋亡的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)。THP-1细胞分为八组:A1组仅加入培养基培养;A2组用佛波酯(PMA)处理;A3组用PMA和脂多糖(LPS)处理,建立M1型巨噬细胞模型;A4组用PMA和人重组IL-4(hrIL-4)处理,建立M2型巨噬细胞模型;A5组用PMA、LPS和ODN1826(TLR9激活剂)处理;A6组用PMA、LPS和IRS869(TLR9拮抗剂)处理;A7组用PMA、hrIL-4和ODN1826处理;A8组用PMA、hrIL-4和IRS869处理。培养72 h后,取各组细胞培养上清液作为条件培养基培养HUVEC 72 h。Western blot检测Notch-1、活性Notch-1、Delta样配体4(DLL4)、发状分裂相关增强子1(Hes-1)蛋白的表达,ELISA法检测IL-10、IL-6和TNF-α的表达,流式细胞术检测内皮细胞凋亡率。结果与A2组和A3组比较,A5组活性Notch-1、DLL4和Hes-1蛋白表达升高(P<0.01),A6组活性Notch-1、DLL4和Hes-1蛋白表达较A5组降低(P<0.01)。A4组IL-10表达高于A1组(P<0.05),A7组IL-10表达低于A4组(P<0.05),A8组IL-10表达高于A4组(P<0.05)。与A1组比较,A3组IL-6表达升高(P<0.05);与A3组比较,A5组IL-6表达增加(P<0.05),A6组IL-6表达降低(P<0.05);与A3组比较,A5组TNF-α表达增加(P<0.05)。与A3组比较,A5组早期、晚期细胞凋亡率均增加(P<0.01)。结论激活TLR9能促进巨噬细胞由M2型向M1型极化,增加由M1型巨噬细胞条件培养基诱导的内皮细胞凋亡;抑制TLR9则有相反的作用。

• 单位
  上海市浦东医院; 复旦大学附属浦东医院