铜绿假单胞菌外膜蛋白F与HSV-1VP22融合DNA疫苗的构建与表达

作者：杨勤; 雍熙; 李婷婷; 余娴; 雷军

来源：川北医学院学报, 2018, 33(03): 338-342.

• 铜绿假单胞菌
• 外膜蛋白F
• VP22
• DNA疫苗

目的:构建铜绿假单胞菌外膜蛋白F与Ⅰ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 1,HSV-1)VP22融合表达的DNA疫苗,并研究其在真核细胞中的表达情况。方法:构建重组质粒pVAX1-Opr F、pVAX1-VP22、pVAX1-VP22-Opr F、pVAX1-Opr F-VP22。原核表达VP22的碳端蛋白,以电洗脱的方法得到纯化蛋白,免疫BALB/c小鼠,制备VP22蛋白的抗血清,Western blot鉴定抗体特异性。最后,以脂质体法将重组质粒转染真核细胞,利用Western blot检测其在真核细胞中的表达情况。结果:成功制备了抗VP22的抗血清,重组质粒在真核细胞中得到了表达。结论:铜绿假单胞菌Opr F与HSV-1VP22融合表达的重组质粒能够在真核细胞中表达,这为进一步的动物实验打下了基础。

• 单位
  川北医学院附属医院; 川北医学院; 重庆医科大学附属第二医院