荧光自相关光谱技术检测抗原抗体亲和力

作者：骆亚梅; 蹇林; 罗浩奇; 黄科赢; 张沃伦; 王柱楼; 张会芝; 肖茜; 黄韶辉

来源：光学学报, 2021, 41(17): 215-226.

• 光谱学
• 荧光自相关光谱
• 最大熵值法
• 荧光免疫分析技术
• 解离常数
• Alexa Fluor647
• 绿色荧光蛋白

本文对荧光自相关光谱(FACS)技术作为免疫分析技术的具体实现和潜在应用进行探究。实验分别以Alexa Fluor647荧光分子和绿色荧光蛋白抗原与抗体相互作用为模型,利用一款桌面式荧光相关光谱仪分别采集荧光分子抗原与不同浓度抗体混合液的荧光自相关数据。将传统FACS技术与最大熵值法相结合,我们可以对抗原-抗体结合程度进行定量和定性评估。使用自主开发的数据分析软件对采集的荧光自相关数据进行分析以获取抗原-抗体解离常数。实验结果表明,FACS技术应用于抗原-抗体亲和力检测,具有简便、快速、灵敏的特点;检测限在皮摩尔和纳摩尔之间;模块化的数据分析软件可标准化操作流程、提高数据分析准确性和可重复性。

• 单位
  中国科学院生物物理研究所; 广东中科奥辉科技有限公司; 中国科学院大学