坝上长尾鸡pmel基因核心启动子的鉴定

作者：刘小辉; 周荣艳; 彭永东; 张传生; 李兰会; 李祥龙

来源：生物工程学报, 2018, 34(11): 1750-1759.

DOI：10.13345/j.cjb.180050

• 坝上长尾鸡
• pmel基因
• 启动子
• 转录因子

为探明坝上长尾鸡的前黑素小体蛋白(Pre-melanosomal protein,Pmel)基因核心启动子区,首先构建了双荧光素酶表达载体,通过脂质体瞬时转染鸡胚成纤维细胞DF1,并利用双荧光素酶检测试剂盒进行启动活性检测。成功克隆了坝上长尾鸡pmel基因5?侧翼区片段1268bp,预测启动子区(-1200–+68)含有2个CpG岛和多种转录因子结合位点,构建了9个含有不同长度pmel基因启动子片段的表达载体及1个核心启动子区突变载体,说明鸡pmel基因启动子的核心区域为-840–+68bp,其中-840–-590bp和-525–-266bp区域为正调控区,-590–-525bp区域为负调控区,多态位点(-456、-435、-410、-374和-341)对pmel基因启动子活性有较大影响。

• 单位
  河北科技师范学院; 河北农业大学; 动物科技学院