摘要

传统药材千里光化学成分复杂,富含生物碱、黄酮和萜类等化合物,极具药用价值。为了提高千里光次生代谢产物的含量,增加千里光药用价值,实现千里光资源的科学利用,本研究进行了千里光组织培养体系的构建和遗传转化初探。本实验以千里光幼嫩茎叶为外植体,通过不同浓度6-BA和NAA的组合,得到最佳愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6.0 g/L琼脂粉,出愈率达92%;得到最佳分化培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6.0 g/L琼脂粉,出芽率为88%;得到最佳不定芽诱导生根的培养基是MS+0.3 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6.0 g/L琼脂粉,生根率为67%。采用农杆菌介导法,将外源报告基因GUS (β-glucuronidase)转入愈伤组织,经组织化学染色法鉴定了GUS的表达,表明GUS基因成功转入了千里光愈伤组织。本实验通过诱导千里光幼嫩茎叶形成愈伤组织,进而分化形成再生植株,同时经农杆菌浸染愈伤组织探索了千里光遗传转化方法,为后续的研究提供了依据。

全文