抗人蔗糖酶卵黄抗体的制备及其稳定性和体外活性研究

作者：邵敏; 王新颖; 卢毓璁; 王敏; 冯昆; 魏妮娜; 杜凤霞; 周鹤峰

来源：中国免疫学杂志, 2016, 32(12): 1785-1789.

• 蔗糖酶
• 鸡
• 卵黄抗体
• 稳定性

目的:制备抗人蔗糖酶(Sucrase,SUC)卵黄抗体(egg yolk immunoglobulin Y,Ig Y)并对其稳定性、体外活性进行研究。方法:采用人SUC蛋白为抗原,免疫海兰灰蛋鸡,水稀释和盐析法提取纯化Ig Y;间接ELISA法监测抗体效价变化并评价其稳定性;SDS-PAGE和Western blot分析Ig Y的纯度和特异性;PNPG法测Ig Y对α-葡萄糖苷酶的体外抑制效果。结果:初次免疫10 d后检测到Ig Y,40 d后效价最高达到1∶12 800;提取的Ig Y重链和轻链分别在65 k D和25 k D处,且能够与抗原蛋白特异性结合;2969℃范围内水浴15 min和p H 47之间37℃水浴4 h,抗体效价无变化;胰蛋白酶与胃蛋白酶作用Ig Y2 h,抗体效价降至一半,延长作用时间,Ig Y对胃蛋白酶耐受力较胰蛋白酶耐受力更强;Ig Y对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用,呈现剂量相关性,半抑制浓度(IC50)值为0.540 mg/ml。结论:抗人蔗糖酶卵黄抗体(S-Ig Y)的成功制备为后续用于2型糖尿病大鼠模型体内实验研究奠定基础。

• 单位
  遵义医学院珠海校区; 齐齐哈尔医学院