摘要
为了提高甲醇酵母多形汉逊的生长性能并降低发酵成本,对其培养基中维生素和氨基酸有效成分进行优化。通过单因素实验和响应面实验相结合,最终确定了两种优化后的培养基组成,分别是以葡萄糖为碳源时的培养基,(NH4)2SO4 2. 5 g/L、KH2PO4 14. 4 g/L、MgSO4·7H2O 0. 5 g/L、trace-metal 2 m L/L、亮氨酸60 mg/L、葡萄糖20g/L、生物素0. 005 mg/L、甲硫氨酸40 mg/L、谷氨酸200 mg/L、天冬氨酸200 mg/L;以甲醇为碳源时的培养基,(NH4)2SO4 2. 5 g/L、KH2PO4 14. 4 g/L、MgSO4·7H2O 0. 5 g/L、trace-metal 2 m L/L、亮氨酸60 mg/L、甲醇10 g/L、生物素0. 005 mg/L、维生素B1 1. 04 mg/L。这两种培养基分别将菌种生物量(OD600)提高了6倍和1. 5倍。优化后的葡萄糖培养基细胞中丙酮酸羧化酶活性提高了1倍,甲醇培养基细胞中丙酮酸脱氢酶酶活性提高3倍以上,丙酮酸羧化酶活性提高了8倍左右。综上,本研究为汉逊酵母大规模发酵提供了参考。
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单位中国科学院大连化学物理研究所; 大连理工大学; 生物工程学院