摘要

目的 研究重楼皂苷H诱导耐替莫唑胺胶质瘤SHG44R细胞程序性死亡的途径和初步分子机制。方法 CCK-8法检测给药后细胞活力影响,透射电子显微镜(TEM)检测给药后细胞形态及细胞器变化,流式细胞术检测给药后细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡和焦亡的相关蛋白表达,RT-qPCR检测焦亡相关mRNA表达水平。结果 CCK-8法检测结果表明重楼皂苷H呈时间剂量依赖性地抑制SHG44R增殖;TEM观察到给药后细胞膜破裂、胞质出现囊泡,提示具有细胞凋亡和焦亡的表征;流式细胞术检测结果表明重楼皂苷H剂量依赖性地介导细胞凋亡;Western blot法检测结果表明Bax、Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-1、Cleaved-N-terminal-GSDMD、IL-1β、IL-18和NLRP3蛋白上调,Bcl-2蛋白下调;RT-qPCR结果表明,与正常组相比,给药后caspase-1、caspase-11、GSDMD、IL-1β、IL-18和NLRP3的mRNA表达水平显著上升。结论 重楼皂苷H诱导耐替莫唑胺胶质瘤SHG44R细胞凋亡与焦亡。