腺病毒载体介导的人14-3-3 γ基因转移对鱼藤酮诱导的多巴胺能细胞损伤的保护作用

作者：陈小武; 王埮; 袁昆雄; 王源江; 王淑荣; 孙圣刚; 陈志斌

来源：中华医学杂志, 2012, (01): 55-59.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2012.01.016

• 14-3-3蛋白质类
• 腺病毒科
• 基因疗法
• 细胞保护
• 基因转移技术

目的探讨人14-3-3 γ基因转移对鱼藤酮诱导的多巴胺能细胞损伤的保护作用。方法用腺病毒载体携带人14-3-3 γ基因(Ad/14-3-3 γ)感染PC12细胞,基因转移成功后,用鱼藤酮处理细胞。四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定细胞活性,DAPI染色法检测细胞凋亡,高效液相色谱检测细胞的分泌功能,激光共聚焦显微镜观察α-突触核蛋白(α-synuclein)的聚集。结果 Ad/14-3-3 γ组细胞吸光度A_(570)(0.46±0.09),高于Ad-null组(0.19±0.08)和鱼藤酮组(0.16±0.07),但低于正常对照组(0.63±0.11),分别与各组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);Ad/14-3-3γ感染组细胞培养液中多巴胺(189±11)ng/ml和去甲肾上腺素(55±8)ng/ml,含量高于Ad-null感染组(79±12,38±7)ng/ml和鱼藤酮组(81±13,39±7)ng/ml(均P<0.01);DAPI染色法显示Ad/14-3-3 γ组凋亡率(27%±6%),高于正常对照组(10%±5%),但明显低于Ad-null组(53%±10%)和鱼藤酮组(56%±12%),分别与各组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);激光共聚焦显微镜下观察Ad/14-3-3γ组细胞胞质内颗粒状α-synuclein聚集体较Ad-null组和鱼藤酮组显著减少。结论腺病毒介导的14-3-3 γ基因转移对鱼藤酮诱导的多巴胺能细胞损伤具有保护作用。

• 单位
  海南医学院附属医院; 华中科技大学同济医学院附属协和医院; 神经内科