摘要
应用血清多肽SPG01、SPG03、SPG04的多抗(PcAb)酶联免疫吸附方法(ELISA),用于鼻咽癌放疗敏感性的检测。以碳二亚胺偶联法制备多肽免疫抗原,免疫动物制备兔血清多抗,用Protein A亲和层析法纯化多抗,选择3种多抗的工作滴度,应用多抗ELISA法检测63份鼻咽癌血清样本。紫外(UV)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)联合监测表明多肽偶联到BSA(牛血清白蛋白)上;动物免疫获得3种兔血清多克隆抗体各40 mL;纯化后的多抗纯度在90%以上,效价均在1∶100 000以上;3种多抗的检测滴度分别为1∶20 000,1∶100 000,1∶10 000;间接ELISA最低检测限为0.03μg/mL,相对标准偏差(RSD)为5.6%。t检验分析3种多肽区分鼻咽癌放疗敏感组与不敏感组,均呈显著差异(P<0.000 1)。ROC曲线表明,3种多肽检测鼻咽癌放疗敏感性的特异性在90%以上,灵敏度为73%93%。3种多肽标志物均能显著区分鼻咽癌放疗敏感组与不敏感组,所应用的多抗ELISA方法检测鼻咽癌放疗敏感性特异性好,灵敏度高,可用于鼻咽癌个体化治疗的放疗敏感性辅助诊断。
-
单位中山大学肿瘤防治中心; 北京蛋白质组研究中心; 蛋白质组学国家重点实验室; 军事医学科学院放射与辐射医学研究所