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摘要
为了研究多核酶表达系统在HEK293细胞中对多药耐药相关蛋白表达抑制的作用,我们构建了含有20个可以自身切割的顺式作用核酶和10个靶向MRP1基因特定位点的反式作用核酶的多核酶表达系统.利用RT-PCR、Western blot和MTT分析了多核酶系统分别与MRP1靶基因质粒和MRPI全长基因质粒共转染的HEK293细胞.结果显示,多核酶表达系统能够明显降低荧光融合蛋白在HEK293细胞中的表达.RT-PCR分析表明,MRP1靶mRNA降低程度与多核酶表达系统所含的反式作用核酶数目有关.Western blot分析显示了与RT-PCR相似的结果.MTY分析表明,多核酶表达系统能够逆转由MRP1基因转染HEK293细胞产生的多药耐药性.结果提示,含有多个核酶的表达系统对MRP1基因的抑制效应优于单核酶的表达系统.因此,该策略可能用于基因治疗肿瘤或其他疾病.
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