化肝解毒汤调控TLR4信号传导通路抑制慢性乙型肝炎大鼠肝纤维化的实验研究

作者：陈永祥; 周舟

来源：中医药信息, 2021, 38(05): 37-43.

DOI：10.19656/j.cnki.1002-2406.210508

• 化肝解毒汤
• 慢性乙型肝炎
• 肝纤维化
• TLR4信号通路

目的:研究化肝解毒汤调控TLR4信号通路抑制慢性乙型肝炎大鼠肝纤维化的机制。方法:随机选取SPF级SD大鼠50只通过腹腔注射四氯化碳(CCl4)建立大鼠肝纤维化模型,余下10只记为空白对照组,注射等体积生理盐水。将建模成功的大鼠随机分为5组:化肝解毒汤高、中、低剂量组,水飞蓟宾组和模型组。化肝解毒汤高、中、低剂量组分别灌胃9.2、4.6、2.3 g/kg化肝解毒汤;水飞蓟宾组灌胃50 mg/kg水飞蓟宾胶囊;空白对照组和模型组灌胃等体积生理盐水。每日1次,连续治疗8周。治疗后通过酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测大鼠血清中Toll样受体4(TLR4)、转录因子NF-κB(NF-κB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、透明质酸(HA)和层黏蛋白(LN)含量。通过苏木素伊红(HE)染色观察大鼠肝脏病理变化;通过Masson染色观察大鼠肝纤维化;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测大鼠肝组织中TLR4、MyD88、NF-κB、TGF-β1 mRNA表达水平;通过蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠肝组织中TLR4、MyD88、总NF-κB、胞核NF-κB、胞质NF-κB和TGF-β1蛋白表达水平。结果:血清TLR4、NF-κB、TGF-β1、HA和LN水平模型组高于空白对照组(P<0.05),水飞蓟宾组和化肝解毒汤高、中、低剂量组均低于模型组(P<0.05)。模型组肝小叶结构已破坏,肝小叶被假小叶替代,肝组织出现大量炎性细胞浸润和大量胶原纤维增生。水飞蓟宾组和化肝解毒汤高、中、低剂量组与模型组相比均出现好转,其中化肝解毒汤高剂量组与空白对照组接近。大鼠肝组织TLR4、MyD88、NF-κB、TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平及胞核NF-κB蛋白表达水平模型组高于空白对照组(P<0.05),水飞蓟宾组和化肝解毒汤高、中、低剂量组均低于模型组(P<0.05);大鼠肝组织胞质NF-κB蛋白表达水平模型组低于空白对照组(P<0.05),水飞蓟宾组和化肝解毒汤高、中、低剂量组均高于模型组(P<0.05)。结论:化肝解毒汤可改善大鼠血清肝纤维化指标,减轻肝组织病变,减轻肝脏纤维化,推测其机制可能与抑制TLR4信号传导,抑制TLR4、MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达水平,抑制NF-κB核位移,引起下游TGF-β1通路抑制,从而降低血清HA、LN表达有关。

• 单位
  河南中医药大学