犬瘟热病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

作者：全传松; 李博韬; 姜骞; 李连峰; 于作; 曲连东

来源：中国兽医科学, 2014, 44(06): 589-592.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2014.06.011

• 犬瘟热病毒
• TaqMan
• 实时荧光定量RT-PCR

为建立快速检测犬瘟热病毒的诊断方法,根据GenBank中犬瘟热病毒核衣壳蛋白(NP)基因的保守序列设计1对特异性引物和1条特异性探针,通过对反应体系和反应条件的优化,建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示,该方法对犬瘟热病毒最低检出量为80copies/μL,是常规RT-PCR的100倍;与其他犬类病毒不发生交叉反应;组内、组间变异系数均小于5%。对收集的67份临床样品进行检测,阳性检出率为64.2%,而常规RT-PCR的阳性检出率为44.8%。研究结果表明,建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR具有良好的敏感性、特异性和稳定性,为犬瘟热的早期诊断提供了技术手段。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 东北农业大学