利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼核受体PXR基因初探

作者：成凯; 冯永永; 周莉; 李凯彬^*; 聂湘平^*

来源：中山大学学报(自然科学版), 2018, 57(05): 115-122.

DOI：10.13471/j.cnki.acta.snus.2018.05.014

• PXR
• CRISPR/Cas9
• 斑马鱼

孕烷X受体(Pregnane X receptor,PXR)是核受体超家族(NRs)中NR1I的重要成员之一,在保护机体免于内源性和外源性物质损伤方面具有重要作用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立PXR基因敲除的斑马鱼模型,为研究环境污染物的毒性机理及代谢过程提供基础模型。根据PXR基因序列,设计gRNA靶位点,体外转录合成gRNA。同时,将设计合成的gRNA与Cas9 mRNA通过显微注射转入斑马鱼受精卵,经孵化、筛选出有效的突变体,并逐代培养杂交筛选出PXR基因敲除突变体。结果表明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功敲除PXR基因,经测序分析获得稳定的PXR(+4/+4)基因纯合体。

• 单位
  中国水产科学研究院珠江水产研究所; 暨南大学