KDM6A表达载体的构建及其对组蛋白H3K27me3修饰的影响

作者：白力格; 赵彩权; 宋丽爽; 刘雪霏; 杨磊; 李光鹏^*

来源：农业生物技术学报, 2019, 27(01): 108-117.

• 组蛋白去甲基化酶
• KDM6A
• H3K27me3
• 转录载体

组蛋白甲基化是一种重要的表观修饰方式,主要参与异染色质的形成、X染色体的失活以及RNA的转录调控。其中组蛋白H3第27位赖氨酸去甲基化酶KDM6A (lysine specific demethylase 6A)具有调控胚胎发育、细胞重编程和细胞分化的功能。目前对KDM6A的研究主要集中在体外非细胞环境下的生化实验,在细胞内的研究较少,并且未见KDM6A过表达的动物模型。本研究通过基因工程手段构建了KDM6A的表达载体pCS2-KDM6A,并将其转染小鼠(Mus musculus)胎儿成纤维细胞。经qRT-PCR检测发现,转染组KDM6A的表达量显著高于对照组(P<0.05);免疫荧光和免疫印迹检测表明,过表达KDM6A可以显著降低H3K27me3的修饰(P<0.05)。本研究成功构建了pCS2-KDM6A载体,此载体为下一步制备动物模型提供了理论基础,对解析KDM6A与H3K27me3在X染色体失活、胚胎发育、细胞重编程等生物学事件的研究机理提供了基础材料。

• 单位
  内蒙古草原生态畜牧产业研究院股份有限公司; 内蒙古大学