逆转录病毒介导的双自杀基因对肝内胆管癌细胞杀伤作用的实验研究

作者：李志伟; 王占民; 刘博; 刘军; 刘春生; 马道新; 吴小鹏

来源：中华肝胆外科杂志, 2004, (11): 52-55.

• 胆管癌
• 逆转录病毒
• 自杀基因
• 基因治疗

目的观察逆转录病毒介导的双自杀基因对肝内胆管癌细胞HCCC9810的杀伤作用,探讨肝内胆管癌的基因治疗方法。方法在脂质体的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PwzlneoCDglytk导入包装细胞PA317,经G418筛选后大量培养产病毒的阳性克隆PA317/CD+tk细胞株,收集病毒上清,转染HCCC9810细胞,再次经G418筛选,获得稳定表达双自杀基因的HCCC9810/CD+tk细胞株。用RTPCR检测双自杀基因的表达。给予前体药物5氟胞嘧啶(5flourocytosine,5FC)和(或)无环鸟苷(ganciciovir,GCV)后,用MTT法测定转基因组及未转基因组HCCC9810细胞的存活率。结果双自杀基因在HCCC9810细胞中可稳定表达,联合使用5FC和GCV对细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应高于单独使用5FC或GCV。结论逆转录病毒介导自杀基因可有效杀死肝内胆管癌细胞,双自杀基因较单一自杀基因具有更强的抗肿瘤作用。

• 单位
  山东大学齐鲁医院