miR-6722-3p调控Toll样受体/核因子-κB对脓毒症大鼠肝肾损伤的影响

作者：张利华; 宋银宏; 孙婧; 秦清荷

来源：中华实用诊断与治疗杂志, 2023, 37(06): 576-582.

DOI：10.13507/j.issn.1674-3474.2023.06.007

• 脓毒症
• 壳多糖酶3样蛋白1
• miR-6722-3p
• Toll样受体
• 核因子-κB
• 大鼠

目的 探讨miR-6722-3p靶向壳多糖酶3样蛋白1(chitinase-3-like protein 1, CHI3L1)调控Toll样受体(Toll-like receptor, TLR)/核因子-κB(nuclear factor-kappa B, NF-κB)信号通路对脓毒症大鼠肝肾损伤的影响及可能机制。方法18只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和过表达组各6只，模型组和过表达组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症模型，假手术组仅开腹暴露盲肠后关腹。术后72 h过表达组尾静脉注射miR-6722-3p siRNA慢病毒，假手术组和模型组正常饲养。造膜后第7天测定3组大鼠尿肌酐及血清白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)水平。采用HE染色观察3组大鼠肝、肾组织形态结构，采用免疫组织化学法检测肝、肾组织CHI3L1表达，采用TUNEL染色检测肝、肾组织细胞凋亡情况，采用实时荧光定量PCR法检测肾组织CHI3L1、TLR4、NF-κB p65 mRNA相对表达量，采用Western blot法检测肾组织CHI3L1、TLR4、NF-κB p65蛋白相对表达量。结果 过表达组、模型组血清IL-1β[(10.07±1.88)、(8.62±1.12)ng/L]、TNF-α[(58.93±10.21)、(56.77±3.62)ng/L]及尿肌酐[(757±210)、(1 189±890)mmol/L]水平均高于假手术组[(6.77±1.03)ng/L、(41.62±3.46)ng/L、(529±102)mmol/L](P0.05)。假手术组肝细胞及肾小管上皮细胞排列规则，细胞核轮廓清晰，肾脏和肝脏组织CHI3L1均呈阳性；模型组个别肾小球萎缩，肝细胞胞浆空泡样变性，肾脏和肝脏组织CHI3L1均呈阳性；过表达组肾小管上皮细胞肿胀、空泡样变性，肾小管上皮脱落、色素沉着，肝细胞胞浆空泡样变性，色素沉着，肾脏组织CHI3L1呈阴性，肝脏组织CHI3L1呈弱阳性。模型组较假手术组肝脏和肾脏细胞凋亡增多，过表达组较模型组细胞凋亡减少。过表达组肾组织CHI3L1、TLR4 mRNA相对表达量均高于假手术组、模型组(P0.05);模型组肾组织CHI3L1、TLR4、NF-κB p65 mRNA相对表达量与假手术组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。模型组肾组织CHI3L1、TLR4、NF-κB p65蛋白相对表达量均高于过表达组、假手术组(P<0.05),过表达组均高于假手术组(P<0.05)。结论 miR-6722-3p靶向CHI3L1调控TLR/NF-κB信号通路延缓脓毒症大鼠肝肾损伤进展，miR-6722-3p过表达可减轻脓毒症大鼠肝肾损伤。

• 单位
  基础医学院; 宜昌市第二人民医院; 三峡大学