沙棘清除DPPH自由基动力学特性研究及活性成分筛选

作者：李倩茹; 李生茂^*; 黄婷; 吴婷

来源：食品科技, 2021, 46(01): 225-231.

DOI：10.13684/j.cnki.spkj.2021.01.036

• DPPH-HPLC法
• 沙棘
• 抗氧化
• 动力学
• IC50

为研究沙棘清除DPPH自由基的动力学规律,并初步明确其抗氧化活性成分,对样品不同初始浓度、反应温度和反应时间进行考察,研究了沙棘清除DPPH自由基的动力学,并在此基础上评价了其清除DPPH自由基的活性。采用DPPH-HPLC法,在单因素实验对DPPH自由基浓度、反应时间和反应温度等条件优化的基础上,通过对比分析沙棘与DPPH自由基反应前后相应色谱峰峰面积的变化(减小或消失),明确其清除DPPH自由基的活性特征色谱峰,再根据特征峰的保留时间,与对照品进行比对初步明确其抗氧化活性成分。沙棘清除DPPH自由基的动力学结果表明:样品初始浓度、反应温度和反应时间对沙棘清除DPPH自由基的速率均有影响,在实验条件范围内,沙棘与DPPH自由基反应的速率随初始浓度增大和反应温度增高而加快,随反应时间延长而减慢,反应的活化能Ea为52.12 kJ/moL,接近二级反应动力学方程,其清除DPPH自由基的IC50值为5.87×102 μg/mL(相当于生药量),具有较强的抗氧化活性;DPPH-HPLC研究结果表明:沙棘与DPPH自由基的最佳反应条件为:DPPH自由基浓度35.5 mmol/L、反应时间90 min以及反应温度40 ℃,此时沙棘样品中12个抗氧化活性成分的色谱峰完全消失或峰面积明显减少,其中初步确认9号和11号色谱峰分别是芦丁和槲皮素的色谱峰。该方法具有试剂用量少、操作简单方便等特点,能快速、灵敏、高通量筛选中药复杂体系中的抗氧化活性成分。该研究为初步明确沙棘清除DPPH自由基的动力学规律、抗氧化活性成分及与活性结合的质量控制提供了一定实验数据。

• 单位
  药物研究所; 川北医学院