RNA干扰联合Cre-loxP系统建立小鼠巨噬细胞RAW264.7 GR表达抑制模型

作者：李晓清; 杨国汉; 李秀英; 钟瑜; 陈林; 徐晓玉

来源：重庆医科大学学报, 2010, (08): 1217-1220.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.2010.08.005

• 糖皮质激素受体(GR)
• RNA干扰
• Cre-loxP系统 GR
• RNAi
• Cre-loxPsystem

目的:应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)及Cre-loxP系统构建针对目的基因糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor,GR)表达抑制细胞模型。方法:设计并合成两对RNAi靶序列,连接至pBS/U6-Neo载体,联合应用Cre-loxP系统及RNAi构建针对目的基因GR的两对重组质粒,对构建的重组质粒采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)及测序的方法进行鉴定,将构建成功的重组质粒及Cre-ERT2质粒稳定共转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用半定量逆转录聚合酶链反应(Reverse transcripti...

• 单位
  重庆医科大学; 中国人民解放军陆军军医大学