FUS1基因原核表达质粒构建与诱导表达

作者：张宝; 霍霞; 彭琳; 齐宗利; 徐锡金; 李燕; 丘波; 郑良楷

来源：南方医科大学学报, 2007, (05): 638-640.

• FUS1基因
• 基因表达
• 原核表达质粒 FUS1 gene
• gene expression
• prokaryotic plasmid

目的构建FUS1基因原核表达质粒,在大肠杆菌[Rosetta(DE3)2plys]中高效表达重组蛋白。方法采用PCR技术从人脐带来源的间充质干细胞中扩增出FUS1基因,并将其接入pET-32a(+),经PCR、测序鉴定后,转化Rosetta(DE3)2plys细菌,并用IPTG诱导表达。结果经过PCR、测序鉴定,克隆了pET32a(+)-FUS1重组子;在低浓度IPTG(25μmol/L)诱导3h,RosettaDE3可以高效地表达重组蛋白,约占细菌总蛋白的40%。结论成功地克隆到FUS1基因,并使其在原核系统中高效表达。

• 单位
  汕头大学; 南方医科大学; 汕头大学医学院附属肿瘤医院