四环素对人牙龈成纤维细胞增殖及凋亡的影响

作者：张青

来源：现代医学, 2022, 50(04): 465-471.

• 四环素
• 人牙龈成纤维细胞
• 增殖
• 凋亡
• 核因子-κB信号通路

目的:探讨四环素(TET)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养HGFs,采用不同浓度(0、5、10、50、100、500、1 000、2 000、2 500μg·ml-1)的TET干预HGFs,细胞计数法(CCK-8)检测TET对HGFs增殖的影响。0、10、100和2 000μg·ml-1 TET培养细胞，分别作为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组；倒置显微镜下观察TET对HGFs生长状态的影响，流式细胞术检测细胞周期的变化，Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡情况，酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)和白细胞介素-6(IL-6)的分泌情况，实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)分析NF-κB信号通路相关蛋白的表达水平。结果:低浓度(10～50μg·ml-1)TET能够促进HGFs的增殖，中浓度(100～1 000μg·ml-1)、高浓度(2 000～2 500μg·ml-1)TET均可抑制HGFs的增殖。低浓度TET对HGFs生长状态无明显影响，而中、高浓度TET组细胞呈现不同程度的不规则形状。低浓度TET组G0/G1期细胞比例增多，S期细胞比例减少，而中、高浓度TET组G0/G1期细胞比例减少，S期细胞比例增多。中、高浓度TET可促进HGFs凋亡。低浓度TET可抑制TNF-α、ICAM-1和IL-6的分泌，而中、高浓度TET可促进TNF-α、ICAM-1和IL-6的分泌。低浓度TET可促进NF-κB p65和IκBα蛋白磷酸化，而中、高浓度TET可抑制NF-κB p65和IκBα蛋白磷酸化。结论:中、高浓度TET可抑制HGFs增殖和细胞周期进程，并诱导细胞凋亡，但是低浓度TET对细胞增殖无明显影响，其作用机制可能与NF-κB信号通路的活化有关。

• 单位
  荆门市第一人民医院