华支睾吸虫排泄分泌抗原McAb的制备及双抗夹心ELISA的初步建立

作者：朱慕春; 刘劲峰; 陆忠奎; 孔德龙^*

来源：中国人兽共患病学报, 2018, 34(10): 873-877.

• 华支睾吸虫
• 单克隆抗体
• ELISA

目的以华支睾吸虫排泄分泌抗原(ESA)免疫小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并建立一种可检测ESA的双抗体夹心酶联免疫吸附试验的方法。方法用ESA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选杂交瘤细胞株,制备高效价单克隆抗体并鉴定;单抗经HRP标记和配对筛选,建立双抗夹心ELISA并分析其特异性及灵敏度。结果成功制备出抗华支睾吸虫ESA McAb:B7、F1;抗体类型均为IgG1,抗体滴度高,特异性好,以筛选到的两株单抗建立双抗夹心ELISA法,最佳线性范围为0.0140.248μg/mL(R2=0.996 9),最低检出限为0.014μg/mL。结论初步建立了检测华支睾吸虫ESA的免疫诊断方法。

• 单位
  徐州医科大学