应用抑制差减杂交法分离粗枝大叶黄杨幼苗的冷诱导表达基因

作者：孙洪波; 王国英; 孙振元; 古润泽; 赵梁军

来源：中国农业科学, 2005, (01): 135-139.

• 大叶黄杨
• 低温诱导
• 抑制差减杂交
• cDNA宏阵列 Euonymus japonicus ‘Zhuzi’
• Cold-induced gene
• Suppression subtractive hybridization (SSH)
• cDNA macroarray

应用抑制差减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)方法,构建冷诱导表达的正向抑制差减cDNA文库,低温处理的幼苗为tester,常温处理为driver,通过cDNA宏阵列差异筛选cDNA文库,得到604个低温诱导或表达增强的候选克隆,对其中的84克隆进行DNA测序,去除冗余的cDNA,在GenBank中进行核酸和蛋白质同源性的比较和功能分析,共有36个单一序列,有12个cDNA未找到同源序列,可能为新基因,表明采用抑制差减杂交方法与cDNA宏阵列技术分离诱导表达的基因是可行的。

• 单位
  农业生物技术国家重点实验室; 中国林业科学研究院; 北京市园林科学研究院; 中国农业大学