通过Crispr-cas9介导抑制KIAA0101基因可诱导肝癌细胞凋亡

作者：王浩南; 李康; 闫融; 陈威; 孙团鹤; 王璇; 朱琨; 党诚学^*

来源：山西医科大学学报, 2019, 50(06): 709-714.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2019.06.003

• crispr-cas9
• KIAA0101基因
• Huh-7细胞株
• 肝癌
• 细胞凋亡

目的构建肝癌细胞KIAA0101基因敲除的稳转株,研究抑制KIAA0101表达后肝癌细胞的细胞行为学改变。方法通过生物信息学筛选sgRNA,通过Crispr-cas9技术,构建抑制KIAA0101基因表达的sgRNA-cas9共转染慢病毒,并对KIAA0101基因敲除的实验组与空白对照组进行细胞增殖、凋亡、细胞周期及克隆形成实验。结果通过生物信息学筛选获得3条sgRNA,其中,sg1、sg3组具有明显的抑制KIAA0101基因表达的功能。通过crispr-cas9技术,获得了基于crispr-cas9技术介导的KIAA0101低表达的Huh-7肝癌细胞稳转株,结果显示,抑制KIAA0101基因表达后,相比对照组,实验组细胞增殖、迁移能力无显著变化,对细胞周期影响不显著(P> 0. 05),细胞凋亡率显著增加(P <0. 05)。结论本研究通过Crispr-cas9技术,构建了Huh-7肝癌细胞KIAA0101基因敲除的稳转株,证实抑制KIAA0101基因表达后,Huh-7细胞凋亡显著增加。

• 单位
  西安交通大学第一附属医院