黄芪菟箭合剂通过抑制RAC1/MR信号通路减轻高糖诱导的足细胞损伤

作者：王亚荣; 董兆珵; 张娜; 刘宝利; 郭传; 朴元林^*; 尹德海^*

来源：山西大学学报(自然科学版), 2021, 44(03): 601-608.

DOI：10.13451/j.sxu.ns.2021023

• 糖尿病肾病
• 黄芪菟箭合剂
• 足细胞
• RAC1
• 盐皮质激素受体

文章主要探讨黄芪菟箭合剂(HTD)对高糖诱导足细胞损伤的影响以及明确RAC1/MR信号通路是否参与其中。选择体外培养的肾小球足细胞作为研究对象,分别经不同浓度黄芪菟箭合剂(HTD,0.01、0.1、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0 mg/mL)、RAC1抑制剂NSC23766(0.5、1.0、1.25、1.5、1.75、2.0、2.5μmol/L)和MR抑制剂依普利酮(0.25、0.5、0.75、1.0、1.25、1.5、2.0μmol/L)干预24 h后,采用乳酸脱氢酶释放法(LDH)分析足细胞损伤程度进而确定三组药物的最佳浓度;随机将分化好的肾小球足细胞分为正常组(5 mmol/L葡萄糖),高糖组(30 mmol/L葡萄糖),黄芪菟箭合剂组(30 mmol/L葡萄糖+HTD),NSC23766组(30 mmol/L葡萄糖+NSC23766)和依普利酮组(30mmol/L葡萄糖+Eplerenone)。采用免疫荧光和免疫印迹法分析足细胞标志蛋白nephrin、ZO-1和通路相关蛋白RAC1和MR的表达水平。LDH分析法研究结果表明,HTD、NSC23766、依普利酮作用于足细胞的最佳给药浓度分别为0.75 mg/mL、1.75μmol/L和1.25μmol/L。免疫荧光和免疫印迹分析结果表明,与正常组相比,高糖组足细胞的标志蛋白nephrin和ZO-1表达水平显著降低(P<0.05),通路相关蛋白RAC1、MR蛋白表达显著升高(P<0.05);而与高糖组相比,黄芪菟箭合剂组、NSC23766组和依普利酮组足细胞的nephrin和ZO-1表达水平显著升高(P<0.05),RAC1和MR蛋白表达显著下降(P<0.05)。这表明高糖可以诱导肾小球足细胞的损伤,且与RAC1/MR信号通路的过度激活有关,而HTD可通过抑制RAC1/MR信号缓解高糖刺激所造成的足细胞损伤。

• 单位
  中国医学科学院北京协和医院; 北京中医医院; 北京协和医学院; 中国中医科学院广安门医院; 首都医科大学