戈壁异常球菌角蛋白酶基因的克隆及功能研究

作者:耿秀秀; 周正富; 刘盈盈; 平淑珍; 王劲*
来源:生物技术通报, 2019, 35(03): 65-70.
DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0976

摘要

旨为深入发掘角蛋白酶重要的基因资源,进一步提高其水解酶活,为工业生产提供理论基础。从分离于新疆戈壁沙漠的戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis)I-0中克隆出一个编码角蛋白酶的基因并命名Dgker。构建原核表达载体pET-22b-Dgker并进行体外诱导表达纯化,通过对羽毛水解活性的测定探究粗酶液的最适温度和pH。结果显示,Dgker蛋白N端前50个氨基酸对蛋白的表达纯化有很大影响。Dgker的重组菌株3d完全分解羽毛,在奶粉平板上重组菌株粗酶液比空载菌株粗酶液降解圈更显著。Dgker适应的温度和pH较为广泛其中最适温度是60℃、最适pH是5.0。Dgker能降解羽毛在以后的工业生产及处理废弃羽毛有极大的应用空间。

全文