GDF-15在高糖缺氧环境下人视网膜色素上皮细胞中的表达及意义

作者：张凌宇; 路强^*

来源：内蒙古医学杂志, 2021, 53(03): 267-386.

DOI：10.16096/J.cnki.nmgyxzz.2021.53.03.004

• 人视网膜色素上皮细胞
• GDF-15
• VEGF
• 姜黄素
• 糖尿病视网膜病变

目的观察生长分化因子15(Growth differentiation factor-15,GDF-15)在模拟高糖缺氧环境下人视网膜色素上皮细胞中的表达,探讨姜黄素对其表达的影响。方法将培养的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelial cells, hRPE)细胞分为正常对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖缺氧组(25 mmol/L葡萄糖+200μmol/L CoCl2)和高糖缺氧加药组(25 mmol/L葡萄糖+200μmol/L CoCl2+20 ng/ml姜黄素)。采用MTT法检测各组细胞增殖率;采用免疫荧光染色法检测各组细胞中GDF-15和血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF)的表达及其定位;采用RT-PCR法检测各组细胞中GDF-15和VEGF mRNA的表达;采用Western blot法定量检测各组细胞中GDF-15和VEGF蛋白的表达。结果 MTT检测显示高糖缺氧组细胞增殖率大于正常对照组,高糖缺氧加药组细胞增殖率低于缺氧组,差异均具有统计学意义(P<0.001)。免疫荧光检测结果显示,正常对照组细胞中GDF-15和VEGF均呈弱性表达,高糖缺氧组细胞中GDF-15和VEGF均呈强阳性表达,高糖缺氧加药组细胞中GDF-15和VEGF表达较高糖缺氧组减弱,GDF-15及VEGF表达位点基本一致。实时荧光定量PCR法检测显示高糖缺氧组GDF-15和VEGF的mRNA相对表达量较正常组与高糖缺氧加药组mRNA相对表达量升高,差异均具有统计学意义(P<0.001)。Western blot法检测显示高糖缺氧组GDF-15和VEGF的蛋白相对表达量均明显高于正常对照组和高糖缺氧加药组,差异均具有统计学意义(P<0.001)。结论体外高糖缺氧环境下可以诱导人视网膜色素上皮细胞中GDF-15表达上调,姜黄素可抑制高糖缺氧环境下视网膜色素上皮细胞的增殖及GDF-15的过表达。

• 单位
  内蒙古自治区人民医院; 内蒙古科技大学包头医学院