慢病毒携带shRNA对乳腺癌HPA基因表达的抑制作用

作者：陈国利; 郑志方; 张学军; 裴天禄; 张金光

来源：中国医学装备, 2017, 14(06): 150-155.

• 乳腺癌
• 乙酰肝素酶
• 短发夹RNA
• MDA-MB-231细胞
• 免疫组织化学
• 蛋白质印迹

目的:以乙酰肝素酶(HPA)基因为靶点,构建短发夹RNA(sh RNA)慢病毒表达载体,研究慢病毒携带的sh RNA对乳腺癌HPA基因表达的抑制作用。方法:以乳腺癌HPA基因为靶基因,根据RNA干扰(RNAi)序列设计原则,通过构建3对sh RNA重组慢病毒的表达载体,转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,在体外采用蛋白质印迹(Western blot)法检测HPA基因蛋白表达水平;在体内构建乳腺癌模型,通过免疫组化检测HPA基因蛋白的表达。结果:在体外实验中,HPAsh RNA-1组和HPA-sh RNA-2组均有效抑制了人乳腺癌MDA-MB-231细胞HPA的表达。在体内实验中,HPA-sh RNA-2组HPA基因蛋白的表达明显低于阴性对照组及空白对照组,HPAsh RNA-2组阳性率与空白对照组比较,差异有统计学意义(x2=12.504,P<0.05)。表明在体内实验中HPA-sh RNA-2组可以下调HPA基因蛋白表达。结论:以HPA为靶点构建sh RNA重组慢病毒载体,体内外实验均能下调乳腺癌HPA基因的表达,可为乳腺癌靶向治疗提供新的靶点。

• 单位
  承德医学院附属医院