连翘FsUGT83A1基因的克隆、生物信息学和表达分析

作者:金宗元; 赵娟娟; 张全玲; 吴娜娜; 王建华; 房信胜*
来源:中药材, 2022, 45(10): 2340-2345.
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2022.10.010

摘要

目的:克隆连翘糖基转移酶基因FsUGT83A1,并对其进行生物信息学和组织表达分析,了解其与连翘苷合成的相关性。方法:基于连翘基因组和转录组数据,利用RT-PCR扩增FsUGT83A1全长cDNA并进行生物信息学分析;运用实时荧光定量PCR检测基因在不同组织中的表达;采用HPLC测定成分在不同组织中的含量。结果:FsUGT83A1基因的蛋白质编码区(CDS)全长为1 365 bp,编码一个由454个氨基酸组成的蛋白,该蛋白为亲水性非跨膜蛋白,亚细胞定位主要在细胞质中。多序列比对分析表明,该基因具有UGT特有的保守序列PSPG-box;系统进化分析表明,FsUGT83A1与拟南芥UGT83A1聚在一个亚家族,与同科植物油橄榄UGT83A1的同源性最高。该基因在叶中的表达显著高于花、果等组织。HPLC定量分析表明,连翘苷在叶中的含量显著高于其他组织。FsUGT83A1的组织表达与连翘苷的组织分布具有显著相关性,推测该基因可能是调控连翘苷糖基化合成过程的功能基因。结论:FsUGT83A1为首次从连翘中克隆得到的UGT基因,为进一步研究该基因的功能及调控机制提供了研究基础。

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