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摘要
目的 研究艾灸治疗庆大霉素耳毒性导致的豚鼠耳聋的作用机制，为艾灸治疗突发性耳聋(sudden sensorineural hearing loss, SSHL)提供科学证据。方法 将18只雄性豚鼠随机分为3组，每组6只：空白组、庆大霉素组、庆大霉素+艾灸组，按照庆大霉素组腹腔注射硫酸庆大霉素120mg/(kg·d),连续14天；庆大霉素+艾灸组肌注硫酸庆大霉素120 mg/(kg·d),并予艾灸治疗15分钟1次/天，连续14天；空白组腹腔注射生理盐水，连续14天，进行干预。14天后对豚鼠进行听觉脑干诱发电位(auditory brainstem response, ABR)阈值检测以观测其听力变化，光学显微镜观察耳蜗血管纹形态，并用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测耳蜗超氧化物歧化酶(supper oxide dismutase, SOD),丙二醛(malondial dehyde, MDA)的含量及血清一氧化氮(nitric oxide, NO),内皮素(endothelin, ET)的含量，PCR检测耳蜗表达的B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)及Bcl-2相关蛋白X(BCL2-Associated X,Bax)的含量，免疫荧光染色半定量法观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)在血管纹的表达及分布。结果 (1)听力阈值：ABR的听力阈值庆大霉素组明显高于空白组；庆大霉素+艾灸组明显低于庆大霉素组而高于空白组(P<0.05)。(2)耳蜗螺旋韧带血管纹形态：空白组螺旋韧带血管纹显示基本正常，粗细均匀顺畅；庆大霉素组可见耳蜗螺旋韧带血管纹屈曲变窄，血管粗细不均；庆大霉素+艾灸组可见耳蜗螺旋韧带血管纹结构稍有不流畅，粗细稍显不均(3)耳蜗组织SOD、MDA含量：庆大霉素组耳蜗组织中SOD含量与空白组比较明显降低，MDA含量与空白组比较明显升高；庆大霉素+艾灸组耳蜗中SOD含量高于庆大霉素组，MDA含量低于庆大霉素组(P<0.05)。(4)血清NO、ET含量：庆大霉素组与空白组比较，血清NO、ET均有所上升(P<0.05)。庆大霉素+艾灸组与庆大霉素组比较，血清NO上升(P<0.05)。(5)耳蜗Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax基因表达：庆大霉素组与空白组比较，庆大霉素组豚鼠耳蜗组织Bcl-2、Bcl-2/Bax均比空白组有所降低(P<0.05),Bax含量两组差异无统计学意义(P>0.05);庆大霉素+艾灸组与庆大霉素组比较，Bax明显下降，Bcl-2/Bax明显上升(P<0.05),Bcl-2两组差异无统计学意义(P>0.05)。(6)血管纹VEGF的分布和含量：庆大霉素组耳蜗血管纹周围组织VEGF蛋白(绿色)荧光强度较空白组稍有增强；庆大霉素+艾灸组VEGF蛋白(绿色)荧光强度比空白组增强，与庆大霉素组相比在管腔结构附近荧光强度增加明显。结论 艾灸能通过提高机体清除自由基的能力，扩张血管促进微循环，保护耳蜗组织细胞和神经等功能，起到改善听力，防治突发性耳聋的作用。
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单位北京中医药大学东方医院
