不同缺氧方法对肉鸡肺动脉平滑肌细胞MIF表达的影响

作者：张瑞强; 李嘉威; 李丽芳; 王彦美; 任昊; 王涛; 路少鹏; 王文魁^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2020, (24): 70-175.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2020.06.0367

• 肉鸡
• 肺动脉平滑肌细胞
• 缺氧
• 巨噬细胞移动抑制因子
• 缺氧诱导因子-1ɑ

为了探讨不同缺氧方法对肉鸡肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)中巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)表达的影响,试验以常氧培养组为对照,不同浓度(400,500,600,700,1 000μmol/L)氯化钴(CoCl2)处理鸡PASMCs不同时间(12,24,48 h),不同强度物理缺氧,即绝对缺氧(向物理缺氧装置Hypoxic incubator通入100%N2)和相对缺氧(向Hypoxic incubator通入3%O2、5%CO2、92%N2)12,24,48 h,采用qRT-PCR、Western-blot检测法,以低氧诱导因子(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)的表达为缺氧标志,利用Hypoxic incubator和化学缺氧模拟剂CoCl2,构建肉鸡PASMCs缺氧模型;同时,检测缺氧条件下鸡PASMCs中MIF表达的变化,并对不同缺氧模型进行比较。结果表明:与常氧对照(0 h)相比,700μmol/L CoCl2处理24 h后PASMCs中HIF-1α及MIF的表达均极显著增加(P<0.01);与常氧对照(0 h)相比,绝对缺氧和相对缺氧48 h,HIF-1α及MIF的表达量均显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01);将700μmol/L CoCl2处理24 h、绝对缺氧(100%N2缺氧48 h)和相对物理缺氧(3%O2、5%CO2、92%N2缺氧48 h)样品放在一起进行统一检测比较,相对物理缺氧PASMSs MIF mRNA的相对表达量最高。说明700μmol/L CoCl2处理24 h,或绝对缺氧48 h,或相对缺氧48 h,均可成功构建鸡PASMCs缺氧模型,并且相对物理缺氧模型优于其他两种模型,能更好反映体内慢性缺氧条件下MIF的变化。缺氧可明显促进鸡PASMCs中MIF的表达,提示缺氧影响PASMCs分泌MIF,进而可能影响细胞的增殖。

• 单位
  山西农业大学; 滨州学院; 山西农业大学信息学院; 生物工程学院