含有NuRR1基因的重组复制缺陷性腺病毒的构建和鉴定

作者：李庆军; 刘军; 赵东晖; 肖颂华; 黎祥喷; 沈庆煜; 阎俊; 邢诒刚

来源：中山大学学报(医学科学版), 2004, 25(S2): 76-78+196.

DOI：10.3321/j.issn:1672-3554.2004.z1.131

• 腺病毒
• NURR1
• 293细胞
• 帕金森病

[目的]构建并鉴定携带NURR1基因的重组复制缺陷腺病毒高效表达载体,为基因调控神经于细胞分化后治疗 帕金森病奠定基础。[方法]将测序鉴定正确的NURR1基因插入穿梭质粒pTrack-CMV后,与Adeasy整合,重组Adeasy质粒在 肾293A细胞内包装成病毒,PCR鉴定并测定病毒滴度,电镜鉴定病毒颗粒。[结果]成功构建的穿梭质粒pTrack-CMV-MURR1 与pAdeasy整合后,重组Adeasyr质粒在肾293A细胞内包装和复制时,细胞病变效应(cytopathogenic effect,CPE)明显,PCR鉴 定病毒DNA中有NURR1基因,病毒滴度测试表明病毒含量高,电镜显示病毒为多面体。[结论]成功构建出含有NURR1基因 的重组复制缺陷性腺病毒表达载体。

• 单位
  神经内科; 中山大学