兔多杀性巴氏杆菌热休克蛋白60基因的原核表达及抗原性分析

作者：卢艳; 郭东春; 刘家森; 原冬伟; 姜骞; 司昌德; 林欢; 崔玉东; 曲连东

来源：黑龙江畜牧兽医, 2012, (07): 108-110.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2012.07.001

• 多杀性巴氏杆菌
• Hsp60
• 原核表达

为了研究多杀性巴氏杆菌(P.multocida,Pm)热休克蛋白60(Hsp60)基因表达产物的抗原性,试验根据已发表的Pm 70株序列(AE004439)设计了1对引物,采用PCR技术扩增了兔多杀性巴氏杆菌C51-17株Hsp60的基因序列,将扩增产物与表达载体pPRO-EX-htb连接,得到重组表达质粒pHT-Hsp60,再用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定并测序确认正确后,将重组表达质粒pHT-Hsp60转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,进行SDS-PAGE分析和Western-blot检测。结果表明:SDS-PAGE表达蛋白约为60 ku,与预期的Hsp60分子质量一致;表达产物...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 黑龙江八一农垦大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 动物科技学院