左归丸促初老大鼠生殖器官血管生成与EPCs促动员因素GM-CSF、SDF-1及其受体关系的研究

作者：宋谦谦; 段恒^*; 彭万春; 魏小晶

来源：中国中药杂志, 2023, 48(16): 4467-4474.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20230413.703

• 左归丸
• 生殖器官血管生成
• 内皮祖细胞
• 粒-巨噬细胞集落刺激因子
• 基质细胞衍生因子-1

该实验旨在研究左归丸促进初老大鼠生殖器官卵巢、阴道血管生成与内皮祖细胞(EPCs)促动员因素粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体的关系，探讨左归丸改善初老大鼠生殖功能低下的作用机制。采用超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)对左归丸浸膏进行中药化学成分分析。然后选用14月龄动情周期紊乱的雌性初老大鼠40只，随机分为初老空白组、结合雌激素组、左归丸低剂量组、左归丸高剂量组，每组各10只；另外选用10只4月龄雌性大鼠作为青年对照组。初老空白组和青年对照组均用20 g·kg-1蒸馏水灌胃，结合雌激素组用65μg·kg-1结合雌激素悬液进行灌胃，低剂量组用11g·kg-1左归丸浸膏灌胃，高剂量组用33 g·kg-1左归丸浸膏进行灌胃，每日1次，连续灌胃15 d。收集各组大鼠血清，用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)法检测血清中促EPCs动员因素SDF-1、GM-CSF水平；苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察卵巢各级卵泡数目、黄体数目、阴道上皮层数、阴道皱襞数以及卵巢、阴道组织血管等在用药组的变化；蛋白免疫印迹(Western blot)法检测卵巢、阴道组织雌激素受体(ER)、粒-巨噬细胞集落刺激因子受体(GM-CSFR)、趋化因子受体(CXCR)4、CXCR7蛋白表达水平。结果发现，初老空白组大鼠黄体数、各级生长卵泡数和血管数减少(P<0.05);阴道黏膜厚度、上皮层数、皱襞数、固有层血管数明显减少(P<0.05);外周血中SDF-1、GM-CSF含量明显降低(P<0.05);大鼠卵巢、阴道组织中ER、CXCR4、CXCR7、GM-CSFR蛋白水平明显下降(P<0.05)。各用药组大鼠的各级生长卵泡数、黄体数、血管数目明显增加(P<0.05),而闭锁卵泡数明显减少(P<0.05),阴道黏膜厚度、上皮层数、阴道黏膜皱襞数和固有层血管数增加(P<0.05);外周血中SDF-1、GM-CSF含量升高(P<0.05);卵巢、阴道组织中ER、CXCR4、CXCR7及GM-CSFR蛋白水平上升(P<0.05)。该实验发现左归丸可能通过上调EPCs促动员因素SDF-1、GM-CSF及其受体水平，进而促进卵巢、阴道血管生成，改善初老大鼠生殖功能。

• 单位
  医药学院; 重庆医科大学