大鼠Toll样受体2基因siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

作者：张赟; 龚敏; 毕杨; 江伟; 喻琴; 李廷玉; 陈洁

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (02): 144-147.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006280

• Toll样受体2
• siRNA
• 重组腺病毒载体
• 免疫调节 TLR2
• siRNA
• recombinant adenovirus vector
• immunoregulation

目的:构建特异性抑制大鼠TLR2基因的重组腺病毒载体,并在大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞中进行功能鉴定。方法:体外合成3对大鼠siTLR2的双链DNA序列,经退火定向克隆到穿梭质粒pSES-HUS中获得pSES-HUS-siTLR2质粒,Pme I线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒进行同源重组获得pAd-siTLR2质粒,脂质体转染HEK293细胞,包装获得Ad-siTLR2腺病毒颗粒,继而感染PC12细胞,通过Real-time PCR和Western blot方法检测3对siRNA对TLR2基因的抑制效率。结果:PCR凝胶电泳和测序结果均证实目的基因正确克隆到腺病毒载体中...

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院