PEDV双抗体夹心ELISA检测方法的建立

作者：马宇聪; 刘增素; 王书博; 周晗; 姜艳萍; 崔文; 王丽; 乔薪瑗; 唐丽杰; 徐义刚; 李一经^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(09): 1152-1159.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0143

• 猪流行性腹泻病毒
• 单克隆抗体
• 双抗体夹心ELISA

为了快速检测猪流行性腹泻病毒,本研究以纯化的家兔抗猪流行性腹泻病毒多隆抗体为捕获抗体,以小鼠抗猪流行性腹泻单克隆抗体为检测抗体,并对单克隆抗体进行HRP标记,由此建立了双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测法,检测抗体的最佳工作浓度为浓度为0.75ug/m L。当D450≥0.233且P/N≥2时判定为阳性。该方法特异性强,与猪传染性胃肠炎、猪轮状病毒均无交叉反应,最低检测量为3.125×103TCID50/m L。该方法重复性较好:批间和批内重复率均小于10%,临床样品检测结果与RT-PCR方法比较,符合率为90.5%。上述结果表明,本研究建立的检测猪流行性腹泻病毒的双抗体夹心ELISA特异性强、灵敏度高,可用于对猪粪样中PEDV的检测。

• 单位
  东北农业大学