磷酸铵镁对羊肾小管上皮细胞的损伤作用

作者：刘若楠; 邹东敏; 刘茂军; 马玉忠^*

来源：中国兽医学报, 2022, 42(04): 786-792.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.04.27

• 磷酸铵镁
• 羊肾小管上皮细胞
• NF-κB
• 炎性因子

为了研究磷酸铵镁(MAP)对羊肾小管上皮细胞(RTECs)的损伤作用，取20份结石羊尿沉渣进行镜检，并观察肾脏组织病理变化；其中在14份尿沉渣中观察到磷酸铵镁晶体，肾组织结构严重受损，RTECs变性坏死。观察尿结石羊症状并采集样品进行实验室检测。胶原酶组织块消化法分离培养羊RTECs,角蛋白18进行鉴定。MAP分别处理羊RTECs 12,24和48 h, CCK-8法检测羊RTECs的活力，Western blot法检测羊RTECs NF-κB信号通路的表达及Caspase-3、Bcl-2和Bax的水平，ELISA法检测细胞上清中IL-6和TNF-α的水平及LDH表达量。结果显示，尿结石羊尿液pH值比健康羊高，血液和尿液镁离子和磷离子水平也明显升高。胶原酶消化能获得较多且完整的肾小管节段，12 d左右细胞融合达80%～90%,呈典型的铺路石状，纯化后95%以上细胞CK-18鉴定为阳性。MAP能显著降低羊RTECs的活力，使IL-6和TNF-α的表达增加，细胞LDH含量增多。MAP组羊RTECs p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白相对表达量增加，凋亡蛋白Caspase-3的表达明显增加，Bcl-2/Bax比值降低。综上所述，MAP能导致羊RTECs炎症反应与损伤，激活NF-κB通路，诱导细胞的凋亡。

• 单位
  山西农业大学; 江苏省农业科学院; 河北农业大学