丹酚酸B对非酒精性脂肪肝细胞模型SIRT1/SIRT3信号通路的研究

作者：任振晓; 张佳佳^*

来源：齐齐哈尔医学院学报, 2022, 43(24): 2313-2318.

• 丹酚酸B
• SIRT3
• SIRT1
• 非酒精性脂肪肝

目的 检测丹酚酸B(Salvianolic acid, Sal B)是否可以通过影响SIRT1/SIRT3信号通路对棕榈酸(Palmitic acid, PA)诱导AML-12细胞建立的非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)细胞模型起到保护作用。方法 将AML-12细胞随机分为五组：正常对照组、Sal B(16μM)给药组、PA组、PA+Sal B(2μM、16μM)预处理组。采用试剂盒检测法测量谷丙转氨酶(Alanine transaminase, ALT)、谷草转氨酶(Alanine transaminase, AST)、甘油三酯(triacylglycerol, TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、丙二醛(malonaldehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide, SOD)含量；Western Blot法检测细胞内SIRT3、SIRT1蛋白的表达qRT-PCR法检测细胞内SIRT3mRNA、SIRT1mRNA的表达。另外，对SIRT1进行RNA干扰实验，分为正常对照组、PA组、PA+Sal B预处理组、PA+SIRT1 siRNA预处理组、PA+Sal B+SIRT1 siRNA预处理组五组。采用Western Blot法及qRT-PCR法检测细胞内SIRT3、SIRT1蛋白表达及mRNA水平。其中PA+Sal B+SIRT1 siRNA预处理组方法为先进行SIRT1 siRNA转染48 h,然后给予Sal B(16μM)预处理6h,最后用PA(200μM)诱导24 h。结果 PA组较对照组ALT、AST、TC、TG、MDA水平明显升高(P<0.01),SOD活力显著下降(P<0.01);Sal B组较PA组ALT、AST、TC、TG、MDA水平明显降低(P<0.01),SOD活力明显升高(P<0.01)。另外，PA组较对照组SIRT1和SIRT3蛋白表达水平及mRNA水平显著下降(P<0.01);Sal B组较PA组SIRT1和SIRT3蛋白表达水平及mRNA水平显著升高(P<0.01)。PA+SIRT1 siRNA组较PA组SIRT3蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Sal B+PA+SIRT1 siRNA组较PA组SIRT3蛋白表达水平未升高。结论 Sal B通过上调SIRT1/SIRT3信号通路改善PA诱导的AML-12细胞非酒精性肝损伤。

• 单位
  南京市妇幼保健院; 齐鲁医药学院; 南京医科大学