CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶的序列分析与原核表达

作者：李佩珍; 张洪勤; 潘若望; 应俊; 郑巧敏; 曹晓恩; 曾兴业

来源：中国微生态学杂志, 2009, (05): 424-426.

DOI：10.13381/j.cnki.cjm.2009.05.018

• 超广谱β-内酰胺酶
• CTX-M-14
• 克隆
• 表达 Extended-spectrum β-lactamase
• CTX-M-14
• Clone
• Expression

目的对大肠埃希菌所产CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行基因克隆和重组表达,探讨其特性。方法以产CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌12号菌总基因组DNA为模板,PCR扩增CTX-M-14,将其克隆入pUCm-T Vector载体后测定该核苷酸序列;再将基因编码区克隆到原核表达载体pET-28α,构建含CTX-M-14基因的重组表达质粒,转化到大肠埃希菌BL21中进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳鉴定表达的酶蛋白后再过Ni-NTA柱纯化。结果PCR扩增出大小为876 bp的基因片段,与GenBank上同类酶的基因序列同源性为100%。大肠埃希菌BL21转化p...

• 单位
  温州医科大学