摘要

目的分析携带blaIMP-4或blaKPC-2的产新德里金属β-内酰胺酶-1 (NDM-1)的肠杆菌科菌的基因型及其质粒转移传播机制。方法收集2012年4月至2014年10月间浙江省温州市和杭州市5家医院细菌培养非重复菌株中碳青霉烯类耐药(如亚胺培南、美罗培南、厄他培南等耐药)肠杆菌科菌33株,应用全自动微生物分析仪对该类菌株进行鉴定和药物敏感试验。并用改良Hogde试验、EDTA协同初筛金属酶试验、超广谱β-内酰胺酶(ESBL)检测(采用美国临床和实验室标准协会推荐的双纸片方法)、高产头孢菌素(AmpC)酶检测(采用头孢西丁三维试验),对试验菌基因包括blaNDM-1在内及ISAba125-NDM连锁基因进行PCR检测,并将扩增产物纯化、克隆后测序,对部分菌株及2株携带blaIMP-4或blaKPC-2的产blaNDM-1基因的肺炎克雷伯菌进行质粒转移、接合与消除试验。结果 33株碳青霉烯类耐药的肠杆菌科菌分别为肺炎克雷伯菌28株,产酸克雷伯菌1株,大肠埃希菌2株,植生乌拉尔菌1株,阴沟肠杆菌1株;分别来自浙江大学医学院附属邵逸夫医院13株、温州市中医院13株、温州市人民医院1株、温州医科大学附属第一医院3株、温州市中西医结合医院3株。有31株确定为产碳青霉烯酶,包括blaKPC-224株、blaNDM-1 3株、blaNDM-51株、blaIMP-43株,其中blaNDM-1阳性菌株中同时携带blaIMP-4或blaKPC-2的各1株,将携带部分阳性基因的菌株与大肠埃希菌EC600或肺炎克雷伯菌ATCC13833进行质粒转移结合试验,获得结合子进行相应基因检测,均获得相应blaNDM-1、ISAba125-NDM等基因。结论碳青霉烯类耐药肠杆菌科菌中最常见的是blaKPC-2型;blaNDM-1、blaNDM-5基因与ISAba125-NDM连锁基因可能有相关;2株blaNDM-1型阳性菌株中有1株同时携带blaKPC-2型基因、另1株同时携带金属酶blaIMP-4型基因。由于这些菌株为多重耐药且基因大部分在质粒上,容易在菌株间发生水平传播,应引起临床高度关注。

  • 单位
    温州医科大学附属第一医院; 温州市中西医结合医院; 浙江省温州市中医院; 浙江大学医学院附属邵逸夫医院