miR-19b-3p靶向MTUS1调控甲状腺髓样癌细胞凋亡的分子机制

作者：陈国; 韩鹏黎; 陈柯茹; 李明闯; 张青松; 陈征; 董汉华; 钱跃军; 吕晶^*

来源：中国癌症杂志, 2021, 31(05): 390-396.

DOI：10.19401/j.cnki.1007-3639.2021.05.005

• miR-19b-3p
• 微管相关肿瘤抑制基因1
• 甲状腺髓样癌
• 凋亡

背景与目的:miR-19b-3p在胃癌、前列腺癌等恶性肿瘤中均呈高表达,其可能作为肿瘤早期诊断及评估患者预后的潜在生物标志物。利用TargetScan靶基因预测软件筛选出的微管相关肿瘤抑制基因1(microtubule-associated tumor suppressorgene1,MTUS1)可能为miR-19b-3p的靶基因,发现MTUS1的3’非翻译区(3’-untranslatedregion,3’-UTR)可能是miR-19b-3p的结合位点。探讨miR-19b-3p是否通过靶向MTUS1表达影响甲状腺髓样癌(medullary thyroid cancer,MTC)细胞凋亡。方法:MTC-TT细胞分为anti-miR-19b-3p组、anti-miR-NC组、pcDNA-MTUS1组、pcDNA组、anti-miR-19b-3p+si-MTUS1组、anti-miR-19b-3p+si-NC组、miR-19b-3p组和miR-NC组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescencequantitativepolymerasechainreaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Westernblot)分别检测miR-19b-3p和MTUS1的表达水平,采用双荧光素酶报告基因实验验证MTUS1是否为miR-19b-3p的靶基因;采用Westernblot检测细胞中Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3的表达水平。结果:miR-19b-3p在MTC组织及细胞系中的表达水平显著升高,而MTUS1的表达水平显著降低。转染anti-miR-19b-3p或pcDNA-MTUS1后可显著增强MTC细胞凋亡能力,促进Bax、cleaved caspase-3的表达,抑制Bcl-2的表达。双荧光素酶报告实验证实MTUS1是miR-19b-3p的靶基因。抑制MTUS1表达逆转了抑制miR-19b-3p表达对MTC-TT细胞凋亡的作用。结论:沉默miR-19b-3p表达可上调MTUS1表达从而诱导MTC细胞凋亡。

• 单位
  郑州大学