突变对嗜热古菌蛋白[P62A]Ssh10b主链构象影响的核磁共振研究

作者：罗权; 方显扬; 邓志威; 王金凤

来源：高等学校化学学报, 2008, (03): 546-550.

• D51N突变
• [D51N/P62A]Ssh10b
• 核磁共振
• 主链指认
• 化学位移比较 D51N mutant
• NMR
• Backbone resonance assignment
• Chemical shift comparison

嗜热古菌蛋白Ssh10b突变体[P62A]Ssh10b具有良好的热稳定性.[P62A]Ssh10b的结构测定结果显示,其α2螺旋上残基K48和D51之间形成了一对盐键,而且,突变D51将影响蛋白的热稳定性.为了探索D51的突变对蛋白热稳定性的影响,构建了突变体[D51N/P62A]Ssh10b的质粒,并获得了高纯度的15N和13C双标记[D51N/P62A]Ssh10b.通过对异核三共振NMR实验数据的解析,完成了对[D51N/P62A]Ssh10b的主链共振近乎完全的指认.比较突变以及未突变蛋白质的主链1HN和15N化学位移,在[P62A]Ssh10b的结构基础上进行分析发现,D51N突变显...

• 单位
  生物大分子国家重点实验室; 中国科学院生物物理研究所; 北京师范大学