重组人β淀粉样蛋白1-42小规模发酵及小量纯化工艺的摸索

作者：申茉函; 王全才; 杨丽

来源：实用药物与临床, 2015, 18(03): 256-259.

DOI：10.14053/j.cnki.ppcr.201503003

• β淀粉样蛋白
• 发酵
• 小量纯化

目的研究重组人β淀粉样蛋白1-42(rh Aβ1-42)在5 L摇瓶中的高密度发酵实验,以及小量纯化工艺的方法。方法分别从甲醇浓度、p H、诱导时间等方面对毕赤酵母重组菌株产生rh Aβ1-42的发酵过程进行了优化;通过硫酸铵沉淀目的蛋白、透析、脱盐和阴离子交换层析,对rh Aβ1-42小量精确的纯化方法进行了研究。结果确定rh Aβ1-42在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件为:在p H 6.0的条件下,以0.5%甲醇诱导72 h,经过硫酸铵沉淀目的蛋白、透析、脱盐和阴离子交换层析,rh Aβ1-42纯度可达94%以上。结论确定了rh Aβ1-42在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件,建立了小量纯化rh Aβ1-42的新方法。

• 单位
  吉林大学; 辽宁省人民医院; 中国医科大学附属盛京医院