miR-20a-5p在肺结核外周血单核细胞中的表达及临床价值

作者：李观强; 张娟娟; 梁娟; 林士军; 刘智; 李国保; 曾常春; 张国良^*

来源：中国免疫学杂志, 2019, 35(14): 1739-1748.

DOI：10.3969/j.issn.1000-484X.2019.14.016

• 肺结核
• 微小RNA
• 单核细胞

目的:探讨结核菌感染过程中单核细胞miR-20a-5p的表达变化情况及其与肺结核诊断、治疗的关系。方法:选取健康人群(HD)、结核菌潜伏感染(LTBI)、活动性肺结核(PTB)各5例,采集外周血并分离外周血单个核细胞(PBMC),利用免疫磁珠分选外周血CD14+单核细胞,提取总RNA并采取miRNA芯片检测,将肺结核差异表达最为显著的miRNA分子筛选出来,采用定量PCR技术在大样本人群中进行验证(每组各10例),并对5例活动性肺结核患者进行动态随访,利用定量PCR技术检测抗结核治疗前、治疗3个月后、6个月后miR-20a-5p分子的表达情况。利用结核菌强毒株H37Rv、弱毒株H37Ra以及BCG分别感染分化的人单核细胞进行体外实验验证。结果:miRNA芯片显示PTB人群与LTBI、HD人群表达谱存在显著差异,TB人群中共发现14个下调的miRNA分子,包括miR-20a-5p。定量PCR技术证实miR-20a-5p分子在TB人群中的表达水平显著低于HD和LTBI,当服用抗结核药后,其表达水平逐渐上调。用H37Rv、H37Ra及BCG在MOI=10时感染分化的人单核细胞,不同菌株均显著下调miR-20a-5p表达,而以弱毒株下调最为明显。结论:无论是体内还是体外,结核菌感染均下调单核细胞miR-20a-5p表达,而抗结核治疗则显著逆转这种抑制状态。

• 单位
  深圳市龙华区中心医院; 中心实验室; 深圳市龙岗区人民医院; 深圳市第三人民医院; 桂林医学院