邻苯二甲酸二戊酯半抗原的合成及酶联免疫分析法的建立

作者：余梅; 张智淮; 张玉超; 吴福勇; 刘旭东^*

来源：食品科技, 2022, 47(07): 296-302.

DOI：10.13684/j.cnki.spkj.2022.07.027

• 邻苯二甲酸二戊酯(DAP)
• 半抗原
• 单克隆抗体(MAb)
• 酶联免疫分析法

邻苯二甲酸二戊酯(DAP)是一种常见的邻苯二甲酸酯类增塑剂，使用范围广泛。为构建一种DAP简便、准确的检测方法，首先进行DAP半抗原的合成，得到半抗原4-氨基邻苯二甲酸二戊酯(DPAP)；采用重氮法将DPAP与蛋白质进行偶联得到DAP完全人工抗原，对免疫BALB/c小鼠进行免疫；免疫后取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选得到一株可产生DAP单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。随后对DPA的间接竞争酶联免疫检测法进行构建，对检测条件进行优化确定最佳检测方法。所制备的DAP MAb特异性强，与DAP结构类似物产生交叉反应的反应率低。所构建的检测法最低检测限IC10为0.51 ng/mL，半数抑制率IC50为17.83 ng/mL，水样中加标回收率为95.36%～104.5%，可用于实际样品中DAP含量的检测，具有良好的应用前景。

• 单位
  茅台学院