醛酮还原酶家族1成员B10通过p27/p-Rb信号通路参与肝癌细胞周期调控

作者：耿楠; 金圆圆; 朱诗璇; 李昱蓉; 郑乐育; 朱维佳; 李艳伟; 韩超; 窦晓光; 白菡^*

来源：中华肝脏病杂志, 2020, 28(10): 861-867.

• 肝细胞癌
• 醛酮还原酶1B10
• 依帕司他
• shRNA
• 细胞周期阻滞

目的醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)与肝癌的发病机制、早期诊断和预后密切相关, 故探讨AKR1B10在肝癌细胞中对细胞周期的影响及其作用机制。方法采用慢病毒LV-AKR1B10-shRNA感染HepG2细胞, 或AKR1B10抑制剂依帕司他处理HepG2细胞, 蛋白质印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测AKR1B10的表达水平;通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸在340 nm处吸光度值的下降检测AKR1B10的活性;CCK-8法及流式细胞术检测AKR1B10低表达及不同浓度依帕司他处理HepG2细胞后对细胞增殖和细胞周期的影响;Western blot检测HepG2细胞中p-Rb, 细胞周期蛋白D1、E1, p27的蛋白表达水平;两样本均数采用独立样本t检验。结果 AKR1B10在肝癌细胞中表达显著升高, 与正常肝细胞相比, HepG2细胞中AKR1B10蛋白相对表达水平为6.71±1.11(P = 0.012)。依帕司他对AKR1B10的酶活性有明显抑制作用, 呈剂量依赖性特点。HepG2细胞中AKR1B10基因被有效沉默, 不同浓度AKR1B10抑制剂依帕司他处理HepG2细胞24、48、72 h后均可抑制细胞增殖, 促进G0/G1细胞周期阻滞, 使p-Rb、周期蛋白D1、E1表达降低, 周期素依赖性激酶抑制蛋白p27表达升高。结论抑制AKR1B10表达和活性可通过p27/p-Rb通路, 促进HepG2细胞G0/G1细胞周期阻滞。

• 单位
  中国医科大学附属盛京医院