摘要
目的 研究解毒化瘀颗粒对H_2O_2诱导LO2肝细胞损伤炎症反应的影响及其可能的作用机制,为慢加急性肝衰竭的防治提供理论基础。方法 利用H_2O_2诱导LO2肝细胞损伤模型,用不同浓度解毒化瘀颗粒工作液进行干预,采用Hochest 33528染色观察细胞形态,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,RT-PCR检测细胞中炎症因子白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor, TNF-α)及Toll样受体4(Toll-like Receptors 4,TLR4) mRNA水平,Western blot检测信号通路蛋白磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylation-mitogen activated protein kinase, p-MAPKs)、磷酸化核转录因子κB(phosphorylation-nuclear factor kappa B, p-NF-κB),TLR4的表达水平。结果 与对照组相比,经H_2O_2处理后,LO2细胞凋亡率明显上升(P<0.01),炎性因子IL-6、TNF-αmRNA水平显著升高(P<0.01),TLR4 mRNA水平亦显著升高(P<0.01)。p-MAPKs、p-NF-κB、TLR4的蛋白表达水平则显著降低(P<0.01)。经解毒化瘀颗粒工作液干预后,细胞凋亡率显著下降(P<0.01),炎性因子IL-6、TNF-αmRNA水平显著降低(P<0.01),TLR4 mRNA水平亦显著降低(P<0.01)。p-MAPKs、p-NF-κB、TLR4的蛋白表达水平则显著升高(P<0.01)。结论 解毒化瘀颗粒对H_2O_2诱导LO2肝细胞的炎症反应具有保护作用,其机制可能与TLR/MAPKs/NF-κB信号通路有关。
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单位湖南中医药大学; 广西中医药大学第一附属医院