摘要
为了获得高纯度的中国鲎血蓝蛋白并探究其潜在的应用价值,实验从中国鲎血淋巴中提取了血蓝蛋白,并用AKTA蛋白纯化系统进行纯化,使用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术对纯化后的血蓝蛋白进行定性分析,最后从uniprot蛋白数据库下载了22条分属5个物种的血蓝蛋白的氨基酸序列,并构建了N-J系统进化树。结果显示,制备的血蓝蛋白纯度较高,从纯化后的中国鲎血蓝蛋白中鉴定到了12种血蓝蛋白的亚基,包括Hemocyanin subunitⅠ、Hemocyanin subunitⅡ、Hemocyanin subunitⅢa、Hemocyanin subunitⅢb、Hemocyanin subunitⅣ、Hemocyanin subunitⅤ、Hemocyanin subunitⅥ等。uniprot数据库显示,这些亚基最早在圆尾鲎和美洲鲎体内被发现。N-J系统进化树显示,中国鲎血蓝蛋白与圆尾鲎和美洲鲎血蓝蛋白具有高度的同源性,并且鲎科动物血蓝蛋白与凡纳滨对虾、锯缘青蟹的血蓝蛋白有较近的进化关系,这意味着可根据虾蟹血蓝蛋白的功能推测中国鲎血蓝蛋白的功能。本研究结果有助于中国鲎血蓝蛋白的功能预测和应用研究。
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单位北海市产品质量检验所; 上海海洋大学; 上海市皮肤病医院