细胞周期蛋白依赖性激酶7基因沉默或敲除抑制卵巢癌细胞增殖及其机制探讨

作者：彭慧昕; 高维强; 庄光磊

来源：肿瘤, 2017, 37(11): 1119-1127.

DOI：10.3781/j.issn.1000-7431.2017.11.285

• 卵巢肿瘤
• 细胞增殖
• 基因沉默
• 基因敲除技术
• 细胞周期蛋白质依赖性激酶类

目的 :探讨细胞周期蛋白依赖性激酶7(cyclin-dependent kinase 7,CDK7)对卵巢癌细胞增殖的作用。方法:应用特异性siRNA转染法沉默卵巢癌OVCA433、TOV-112D和IGROV1细胞中CDK 7基因表达后,采用CCK-8法检测细胞增殖能力。应用成簇的规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR)及其相关核酸内切酶9(CRISPR-associated endonuclease 9,Cas9)基因编辑系统敲除卵巢癌HEY、OVCA420、OVCA433和IGROV1细胞中的CDK 7基因后,采用克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。用CDK7抑制剂THZ1处理卵巢癌TOV-112D、IGROV1、OVCA433、OVCAR8、OV90、SKOV3和COV413B细胞后,采用CCK-8法和克隆形成实验检测TOV-112D、IGROV1、OVCA433、OVCAR8和OV90细胞增殖和克隆形成能力,蛋白质印迹法检测IGROV1、OVCA433、SKOV3和COV413B细胞中CDK7蛋白表达水平和RNA聚合酶Ⅱ磷酸化水平。结果:沉默或敲除CDK 7基因后,卵巢癌细胞的增殖和克隆形成能力均明显减弱(P值均<0.05)。THZ1处理可抑制卵巢癌细胞的增殖和克隆形成,并下调CDK7蛋白表达和RNA聚合酶Ⅱ磷酸化(P值均<0.05)。结论:CDK7可能通过调控RNA聚合酶Ⅱ磷酸化,促进卵巢癌细胞的增殖。

• 单位
  上海交通大学; 癌基因与相关基因国家重点实验室; 上海交通大学医学院附属仁济医院; 生物医学工程学院